נהגי אמבולנס עוברים הכשרה מקצועית. בהתאם לתקנות המקומיות, אמבולנסים חייבים להיות מאוישים על ידי נהגים מסורים המחזיקים במעמד המתאים של רישיון הנהיגה. נהגים אלו חייבים להיות בעלי ניסיון נהיגה של שלוש שנים לפחות ורישום נקי בנוגע לתאונות חמורות בשלוש השנים האחרונות, המוכיחים את היכולת לנהוג במהירות ובבטחה בתנועה כבדה, בלילה ובתנאי מזג אוויר קשים.
ההדרכה מכסה גם מיומנויות כגון בקרת החלקה ונהיגת שטח.- למרות שמהירות בהחלט חשובה, נסיעה חלקה היא חיונית בעת הסעת חולה קשה או פצוע קשה בזמן שהצוות הרפואי מנהל טיפול חירום. נהיגה מהירה ללא נדנוד מוגזם בפניות או מהמורות צורמות בכבישים לא ישרים דורשת כישורי נהיגה יוצאי דופן ורמת ריכוז גבוהה.
מרכזי שירות רפואת חירום מקומיים עורכים הדרכות בטיחות קבועות לנהגים, המכסים את חוקי התעבורה, מקרי מקרים של תאונות טיפוסיות, נקודות בטיחות מרכזיות לנהיגה בחירום, ותחזוקה שוטפת ופתרון תקלות ברכב. יתר על כן, מאורגנות תרגילי מיומנויות שנתיים, אימון רענון ותחרויות כדי להעריך הן ידע תיאורטי (תקנות תעבורה ונהלים תפעוליים) והן מיומנויות מעשיות (בדיקת רכב, העלאת/פריקה של אלונקות, התקנת שרשרת שלג, החלפת צמיגים, החייאה וכו'), ובכך לשפר באופן מתמיד את הכשירות הכוללת של הנהגים ויכולות התגובה לשעת חירום.
אמבולנסים מצוידים בדרך כלל בהגה כוח, מוטות הגנה נוספים מפני התהפכות ומערכות מתלים אחוריות משוונות כדי להבטיח נסיעה חלקה. קיבולת הנוסעים משתנה לפי סוג הרכב; למשל, אמבולנסים בטיפול נמרץ מארחים בדרך כלל לפחות שבעה אנשים, בעוד שאמבולנסים בלחץ שלילי- מארחים לפחות שישה. תצורות אלה כוללות את הנהג, הצוות הרפואי, נושאי אלונקות והמטופל; עם זאת, במצבי תאונה או חירום, רק אלונקה אחת מועברת.
שירות אמבולנס יעיל אמור להיות מסוגל להגיע למקום תוך 20 דקות מרגע קבלת קריאת חירום. עם זאת, ללא קשר לאיכות ההכשרה שקיבל הצוות, הגעה מהירה היא לעתים קרובות מאתגרת-במיוחד בתוך תנועה עירונית צפופה או באזורים עירוניים ישנים ורעועים שבהם עשוי להיעדר שילוט רחוב.
